31 марта 1851 года торжественным богослужением в храме Вознесения Господня на Вознесенской улице (ныне улице Степана Разина) в губернии открылась Самарская епархия. Собор, в котором проходило торжество, в тот же день был объявлен кафедральным. Более чем на сорок лет он стал главной святыней города. Его посещали все именитые гости города. Именно в нем было освящено легендарное Самарское знамя.

На следующий день в Самаре открылся Архиерейский дом. Он заведовал имуществом и денежными средствами епархии, а располагался на углу Дворянской и Алексеевской улиц (ныне улиц Куйбышева и Красноармейской) в здании, арендованном у помещика Д.А.Путилова.   В штате дома числилось десять человек, в том числе два иеромонаха, эконом, казначей, иеродьякон, послушники. Первым самарским епископом был Евсевий (в миру Евфимий Поликарпович Орлинский). При нем в Самаре было открыто духовное училище, попечительство для бедного духовенства, основана Иверская женская община.

Самарское епархиальное управление сыграло огромную роль в нравственном воспитании жителей края. Оно открывало приходские школы, духовные училища, приюты для бедных и сирот, госпитали для раненых воинов, боролось с голодом, а также активно содействовало строительству новых монастырей, церквей, часовен.